木质包装松材线虫制样及木样保存方法的研究下施工工具

木质包装松材线虫制样及木样保存方法的研究(下)

3、 结果分析

3.1 表1.几种制样方法线虫分离数量的比较（样品重16克）

时 间 方 法 1小时 1

2小时 4小时 8小时 2小时

薄木片mm  (108X3)mm 0 100 140 60 10

刨 花 ０ 12 6 4 2

锯 未 ０ 1　 2 0 0

国产钻头2.8cm 0 2 1 0 0

国产钻头1cm 0 3 5 1 0

国产钻头0.8cm 0 0 1 0 0

手 钻3.2cm 0 2 4 2 0

手 钻2.5cm 0 3 5 4 1

日产钻头0.65cm 0 8 12 5 0

日产钻头1.1cm 0 14 16 7 2

注：上述线虫数为三次试验平均值。下同。

表2.样品大小与线虫分离数量的比较（样品重数克）

时 间 方 法 1小时 12小时 24小时 28小时 72小时

薄 木 片 1×0.8×0.3（cm 2 130 263 15 7

薄 木 片 2.5×0.8×0.3（cm 13 120 227 44 12

表3.线虫滤纸与定量滤纸分离线虫的效果比较（样品重线）

时 间 方 法 3小时 12小时 24小时 48小时

线虫滤纸 14 110 120 27

定量滤纸 7 100 120 18

直接浸泡 10 90 130 20

注：样本大小为1×0.8×0.3(cm)

表4.不同存放方法线虫分离数量的比较（样品样重6克）

时 间 方 法 初始 15天 30天 45天 60天

自然裸露 30 13 2 0 0

保鲜存放 30 27 25 23 22

保温保湿 30 60 25 15

注：样本15×10×0.8(cm)

3.2 分析

3.2.1 表1所列10种制样方法，经过72小时分离所获 线虫，以薄木片制样法效果最为显著，累计获得的线虫是其它方法的8-310倍。从1小时到72小时5个时间段分离线虫的结果来看，以12-24小时为线虫逸出的高峰期。用薄木片法制样，木质纤维未受到损坏，而其它诸种方法获得的小样，木质纤维不同程度被扭曲，以及干燥磨擦产生高温，对线虫的生存产生了致命的影响。日产木工钻头，以及刨花法制样，由于木质纤维相对受损、挤压相小，线虫量就略大。

3.2.2 表2所列样本长度在1-2.5cm范围内，在12-24小时所获得的线虫量大致相等，在此范围内，线虫逸出与木样长度无关；在样品量40克的情况下，1小时就能获取样木中的线虫；对照表1看出，一定时间内随着样本量成倍增加，线虫逸出量增加，但不呈倍量增加。

3.2.3 表3所列，样品为薄木片，48小时检查线虫时，采用进口线虫滤纸，定量滤纸辅垫与样本直接浸泡获得的线虫量大致相等，且解剖镜下的清洁度也大致相等。在制取薄木片过程中，一些微小的木屑在制作过程中丢失，已很整洁，完全可以省去滤纸或双层纱布

，如果要获得与滤纸同样的清洁程度，将薄木片先用水冲洗一下再分离。



3.2.4 表4所列，含线虫的木样自然存放不到两个月，木样中分离不到活线虫；经4℃左右的保鲜保存，两个月内样本中的线虫量无显著变化；25℃保湿条件下，线虫在15天内线虫总量提高，随着时间的推移，线虫量呈下降趋势。木样自然裸露存放，首先是含水量的大量损失，失水到一定限度线虫开始死亡。在保鲜保存的情况下，含水量相对稳定，一定时间内能保持原有状态。线虫在保温、保湿条件下，各方面环境相对适宜能够进行繁殖生长，至于一个月左右线虫量下降，应与线虫所处环境其它制约因素有关，本文不作分析。

4 、讨论

4.1 考虑到取、制样方便、快捷和制成样品的整洁性以及线虫的分离效果，实际检疫工作中，应选取有代表性的木块大样带回实验室，用锯、斧制成薄木片样进行线虫分离，同时用便携式电钻（钻头采用日产木工钻头，直径为11mm）在现场继续钻取有代表性样点2-3，将钻下物带回实验室一并进行线虫分离，此法能够明显提高线虫的检出率。为了加快线虫的检出速度，我们也试验用庶糖法直接分离锯屑里的线虫，整个过程在一小时内完成，但线虫量非常少。同样对电钻的钻下物加水直接镜检也能发现少量线虫，但线虫检出率也非常低。4.2适当加大分离线虫所用的样品量，能较快发现线虫。对于特殊情况，我们可以将样品尽可能地劈小，制成40克左右的小样，分装在两个线虫分离器中在3小时内基本能确定木样是否携带线虫。如果木样线虫量大，1小时就能确定。

4.3 口岸木包装松材线虫检疫工作，每天进行很多批次，改进型线虫分离器法，既有浅盘法样品容量大，样品均匀散布的特点，又能直接获得分离的线虫，方便、适用，值得在口岸木质包装松材线虫检疫工作推广使用。

4.4保鲜存放含线虫木样的方法，使检疫结果的可重复性有了保证，在对外谈判工作中尤为重要。在试验中我们同时发现，直接将含线虫木样放在保温保湿培养箱中培养，在2-3天内能大量获得雌雄成虫，加快了鉴定速度。同时我们不难发现，利用 夏天的酷暑对木质包装内松材线虫的虫口密度有降低作用。

作者/ 周 弘

（连云港检验检疫局

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